Në kimi, hollimi është procesi i zvogëlimit të përqendrimit të një substance në një zgjidhje. Hollimi me zinxhir është hollimi i përsëritur i një zgjidhjeje për të rritur shpejt faktorin e hollimit. Kjo procedurë zakonisht kryhet në eksperimente që kërkojnë zgjidhje shumë të holluara me saktësi të lartë. Për shembull eksperimentet që përfshijnë kurbat e përqendrimit në një shkallë logaritmike ose eksperimente për të përcaktuar densitetin e baktereve. Hollimet e zinxhirit përdoren gjerësisht në eksperimentet shkencore të tilla si biokimi, mikrobiologjia, farmakologjia dhe fizika.
Hapi
Metoda 1 nga 2: Kryerja e hollimit bazë
Hapi 1. Përcaktoni tretësirën e duhur të tretësit
Veryshtë shumë e rëndësishme të përcaktohet lëngu që do të përdoret për hollim. Shumë zgjidhje janë të tretshme në ujë të distiluar, por kjo nuk është gjithmonë rasti. Nëse jeni duke holluar bakteret ose qeliza të tjera, bëjeni këtë në një medium kultivimi. Lëngu që zgjidhni do të përdoret për të gjitha hollimet e zinxhirit.
Nëse keni dyshime se cili tretës të përdorni, kërkoni ndihmë ose shikoni në internet. Kërkoni shembuj nga të tjerët që kanë bërë hollime të ngjashme zinxhir
Hapi 2. Përgatitni një numër tubash provë që përmbajnë 9 ml hollues
Tubat e provës përdoren për hollime boshe. Së pari, vendosni mostrën e patretur në tubin e parë, pastaj bëni hollimet me radhë në tubat e ardhshëm.
- Etiketoni të gjitha tubat e përdorur para fillimit të hollimit në mënyrë që të mos ngatërroheni pasi eksperimenti të jetë në punë.
- Çdo tub do të mbushet me 10 hollime, duke filluar nga tubi, substanca e të cilit nuk është holluar. Hollimi në tubin e parë është 1:10, i ndjekur nga 1: 100 në tubin e dytë, 1: 1000 për të tretin, dhe kështu me radhë. Përcaktoni sasinë e hollimit që duhet të kryhet paraprakisht, në mënyrë që të mos humbni tretësirën e tretësit.
Hapi 3. Përgatitni një epruvetë që përmban të paktën 2 ml tretësirë të patretur
Sasia minimale e tretësirës që do të hollohet për të kryer këtë hollim zinxhir është 1 ml. Nëse përdorni vetëm 1 ml, nuk do të mbetet zgjidhje e patretur. Etiketoni BLM për tretësira të patretura.
Përziejeni tretësirën tërësisht para fillimit të hollimit
Hapi 4. Kryeni hollimin e parë
Merrni 1 ml tretësirë të patretur nga epruveta BLM me një pipetë dhe vendoseni në një epruvetë të etiketuar 1:10 që përmban 9 ml hollues, pastaj përziejeni tërësisht. Tani ka 1 ml tretësirë të patretur në 9 ml hollues. Kështu, zgjidhja është holluar me një faktor hollimi prej 10.
Hapi 5. Kryeni hollimin e dytë
Për hollimin e dytë, merrni 1 ml tretësirë nga tubi 1:10, pastaj vendoseni në tubin 1: 100 i cili gjithashtu përmban 9 ml hollues. Sigurohuni që tretësira në tubin 1:10 të jetë përzier plotësisht para se ta shtoni në tubin tjetër. Përsëri, sigurohuni që hollimi në tubin 1: 100 të jetë përzier plotësisht. Zgjidhja nga tubi 1:10 u hollua 10 herë në tubin 1: 100.
Hapi 6. Vazhdoni këtë procedurë për të kryer hollime me zinxhir më të gjatë
Ky proces mund të përsëritet sa herë të jetë e nevojshme për të marrë përqendrimin e dëshiruar të tretësirës. Në eksperimentet që përdorin kthesat e përqendrimit, mund të kryeni hollime zinxhir për të prodhuar një numër zgjidhjesh me hollime 1, 1:10, 1: 100, 1: 1.000.
Metoda 2 nga 2: Llogaritja e Faktorit të Hollimit dhe Koncentrimit Final
Hapi 1. Llogaritni raportin e hollimit të fundit në hollimin zinxhir
Raporti total i hollimit mund të përcaktohet duke shumëzuar faktorin e hollimit nga secili hap në hapin përfundimtar. Ilustrimi matematikor është me formulën Dt = D1 x D2 x D3 x… x D , Dt është faktori i hollimit total dhe D është raporti i tretësit.
- Për shembull, le të themi që ju bëni një hollim 1:10 4 herë. Lidheni faktorin tretës në formulën: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
- Faktori i tretësit në tubin e katërt në këtë hollim zinxhir është 1: 10,000. Përqendrimi i substancës pas hollimit është 10.000 herë më i ulët se para se të ishte holluar.
Hapi 2. Përcaktoni përqendrimin e tretësirës pas hollimit
Për të përcaktuar përqendrimin përfundimtar të një solucioni pas një hollimi zinxhir, duhet të dini përqendrimin e tij fillestar. Formula është Cfund = Cfillim/D, Cfund është përqendrimi përfundimtar i tretësirës së holluar, Cfillim është përqendrimi fillestar i tretësirës origjinale, dhe D është raporti i paracaktuar i hollimit.
- Për shembull: Nëse filloni me një zgjidhje qelizore, përqendrimi i së cilës është 1.000.000 qeliza për ml dhe raporti i hollimit është 1.000, cili është përqendrimi përfundimtar i mostrës së holluar?
-
Duke përdorur formulën:
- Cfund = Cfillim/D
- Cfund = 1.000.000/1.000
- Cfund = 1000 qeliza për ml.
Hapi 3. Sigurohuni që të gjitha njësitë janë të njëjta
Kur kryeni çdo llogaritje, sigurohuni që njësitë të jenë gjithmonë të njëjta në fund të llogaritjes. Nëse njësia fillestare është qeliza për ml, sigurohuni që njësitë të mbeten të njëjta në fund të llogaritjes. Nëse përqendrimi fillestar është pjesë për milion (bpd), atëherë përqendrimi përfundimtar duhet të jetë gjithashtu në njësi bpj.
